在全球新冠疫情（COVID-19）尚未完全平息之際，猴痘疫情異軍突起。八月初美國聯(lián)邦政府宣布進入公共衛(wèi)生緊急狀態(tài)，以加強應對猴痘疫情。目前，美國已累計6600多人感染猴痘，是全球病例最多的國家。

美國宣布進入公衛(wèi)緊急狀態(tài)，意味著美國政府將為此騰出資金和其他資源來對抗猴痘病毒。美國衛(wèi)生與公眾服務部長貝塞拉（Xavier Becerra）說：“我們準備將應對這種病毒的反應提升到一個新的水平，我們敦促每個美國人認真對待猴痘?！卑讓m表示已經(jīng)提供了超過110萬劑疫苗，并幫助將美國國內(nèi)的診斷能力，提高到每周可做8萬次的測試。

美國聯(lián)邦政府暨FDA對于猴痘病毒的應對分為檢測，預防，和治療幾個方面。本文總結(jié)了目前FDA對于猴痘檢測的態(tài)度和猴痘檢測試劑的批準情況。

（1）FDA對于檢測試劑的批準

猴痘病毒是正痘家族的一種，正痘家族的其他成員還包括天花病毒，牛痘病毒等。在FDA的官方數(shù)據(jù)庫里面注冊的正痘檢測試劑一共有4款510（K），還有一款de Novo， 都是美國疾控中心（CDC）注冊的，也就是說到目前為止還沒有任何私營企業(yè)注冊過這個產(chǎn)品。

所有這幾款產(chǎn)品都是用“非天花正痘病毒實時 PCR 引物和探針組合試劑”來命名的， 實際上這幾種產(chǎn)品基本是同一種。顧名思義，產(chǎn)品是針對除了天花以外的正痘病毒家族，而不是單單猴痘病毒的。具體情況分析如下：

K053469

K053469是FDA最早批準的關(guān)于正痘家族的檢測試劑。試劑的申請人是美國疾控中心（CDC）。它采用實時PCR引物和探針組合，主要目的不是用于猴痘感染，而是用于監(jiān)控天花疫苗接種時產(chǎn)生的不良反應，比如牛痘感染。這個試劑不能檢測天花病毒，也不能區(qū)別猴痘和牛痘病毒。產(chǎn)品于2005年獲得批準。

K181205

K181205是FDA于2018年9月20號批準的，試劑的申請人也是美國疾控中心（CDC）。同樣采用實時PCR引物和探針組合，用于監(jiān)控天花疫苗接種時產(chǎn)生的不良反應，比如牛痘感染。

這個試劑和K053469幾乎一樣， 唯一的區(qū)別是采用了不同的原料，和更新了使用目的。當時的背景是擔心天花病毒可能被恐怖分子利用， 因此美國在小范圍內(nèi)恢復了天花疫苗的接種。牛痘是天花疫苗的組成成分，可能會造成接種人感染， 因此FDA批準的這個試劑的主要目的也是用于探測牛痘病毒的感染。同樣的，這個試劑不能檢測天花病毒，也不能區(qū)別猴痘和牛痘。

K221658

時間轉(zhuǎn)眼到了偉大的2022年。猴痘病毒登上了舞臺。FDA于6月10日批準了一款新的檢測試劑K221658.

K221658的實質(zhì)等同產(chǎn)品是上面提到的K181205. 事實上， 兩款產(chǎn)品基本一樣， 一些細小的區(qū)別表現(xiàn)在：

◆申報的目的是應對新型猴痘病毒而不是牛痘病毒。

◆產(chǎn)品使用的試劑和儀器有所改進

◆產(chǎn)品的性能數(shù)據(jù)在FDA網(wǎng)站上沒有公開，但是據(jù)內(nèi)部消息，性能有一定的改進。

產(chǎn)品使用熒光探針，該探針由連接在寡核苷酸的5' 端的報告染料(FAM)和連接在 3' 端的猝滅劑 (BHQ1) 組成。探針識別位于正向和反向引物之間的特定目標序列。在 PCR 循環(huán)的延伸階段，Taq聚合酶的 5' 核酸酶會降解探針，導致染料與猝滅劑分離，從而產(chǎn)生熒光信號。在每個循環(huán)中，更多的染料分子從探針上裂解下來，從而在PCR 期間實時監(jiān)測熒光強度。該測定中使用的 Taq 聚合酶在室溫下是無活性的，在95°C 時會被激活，從而最大限度地減少非特異性擴增產(chǎn)物的產(chǎn)生。

和以前兩款產(chǎn)品一樣，產(chǎn)品的申請人是美國疾控中心（CDC），產(chǎn)品只可以在國家響應實驗室網(wǎng)的成員實驗室（LRN實驗室）使用。這是經(jīng)過專門認證的高質(zhì)量實驗室，目前在47個州有68家實驗室。

K221834

兩周后的6月23日， FDA再次出手，批準了K221834. K221834和前面提到的K221658 是完全相同的產(chǎn)品， 只不過把授權(quán)實驗室從國家響應實驗室網(wǎng)的成員實驗室（The Laboratory Response Network）擴大到疾控中心特許實驗室（CDC designated laboratories.），目的在于擴大總體測試能力。

目前全美國有四家CDC特許實驗室可以運行這個測試， 很快會有第五家實驗室獲得CDC特許。

De Novo DE070001

De Novo是美國創(chuàng)新器械的流程。但是CDC提交的這款DE070001是一個奇怪的存在。它是在2007年由疾控中心（CDC）提交的，卻在2018年才被批準，批準日期是2018年9月21號，也就是上面提到的K181205的批準日期的第二天。（見下圖） 目前FDA網(wǎng)站上沒有這個產(chǎn)品的任何信息，F(xiàn)DA 和CDC在討論猴痘病毒檢測的時候也從來沒有提到這款試劑。

實驗室自研檢測試劑

除了上述FDA批準的試劑以外，F(xiàn)DA在7月27日的市政廳會議上再次證實，F(xiàn)DA允許檢測實驗室使用自己研發(fā)的猴痘檢測試劑或檢測方法， 前提是檢測方法經(jīng)過完整的方法驗證，并且只在本實驗室使用。 這樣開發(fā)出來的檢測方法不需要FDA的批準和備案。

FDA這樣做的目的也是為了擴大檢測能力。FDA在新冠疫情初期也采用了同樣的做法。

猴痘樣本的采集

7月15日， FDA發(fā)布安全通報，在猴痘樣本的采集時候，要求只能采用病變組織的拭子樣本。目前的臨床證據(jù)不支持其他的樣本采集方式，比如唾液和血液。病變組織的干拭子，VTM 中的病變組織拭子或結(jié)痂是可以接受的。采樣拭子可以是經(jīng)過滅菌的塑料材質(zhì)（polyester，nylon等）

解讀

由于猴痘病以前在美國很少見，CDC 開發(fā)的試劑是目前唯一經(jīng)FDA 510(k) 批準的檢測方法。該檢測方法流程比較復雜， 對操作人員的專業(yè)要求較高，需要經(jīng)過培訓才能上崗，所以目前的使用僅限于國家響應實驗室網(wǎng)的成員實驗室 （LRN）或CDC特許實驗室。

目前美國市場上用于猴痘檢測是試劑雖然有4個510（K）號碼和一個De Novo號碼，但實際上都是疾控中心（CDC）開發(fā)的同一款產(chǎn)品。這款產(chǎn)品其實有他的缺陷。由于它不能區(qū)別猴痘， 牛痘， 或其他正痘家族的病毒，也不能用于檢測天花病毒， 所以不能用于確診猴痘，而只能作為主要診斷手段之一。

目前美國市場上還沒有FDA批準的商業(yè)檢測試劑，主要原因是以前美國市場上的需求不高，開發(fā)技術(shù)難度較大（比如CDC的方法一直無法區(qū)分猴痘和牛痘），以及FDA缺乏政策支持的力度（相對于新冠檢測而言）。

現(xiàn)在美國宣布進入公衛(wèi)緊急狀態(tài)，F(xiàn)DA可能會調(diào)整對于開發(fā)猴痘檢測試劑的政策支持力度，讓我們拭目以待。

是否在美國申報猴痘試劑是一個商業(yè)決定， 取決于對猴痘流行模型的預測。目前CDC開發(fā)的試劑已經(jīng)可以滿足當下美國的檢測需求，據(jù)曼度醫(yī)械咨詢估算，目前每天的實際檢測量小于最大檢測能力的50%。當然這個情況也可能會隨著猴痘的進一步流行而改變。

對于有興趣開發(fā)猴痘試劑的公司，猴痘的質(zhì)控樣可以在美國國家標準實驗室（NIST）或一家名叫Twist Biosciences的公司購買。

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